Sujet de stage : La biosynthèse des collagènes fibrillaires est un processus complexe et finement régulé dont le dysfonctionnement est à l’origine de nombreuses pathologies génétiques et acquises. Le projet proposé s’intéresse à l’étape limitante de ce processus qui est la maturation C-terminale des procollagènes par la protéase BMP-1 et la protéine régulatrice PCPE-1. Nous avons récemment résolu la structure cristallographique du complexe formé par le C-propeptide du procollagène III et PCPE-1. Grâce à une étude de modélisation moléculaire, nous avons pu générer de nouvelles hypothèses sur le mode d’interaction du domaine catalytique de BMP-1 avec ce complexe. L’objectif du stage sera (1) de valider ces hypothèses par mutagénèse dirigée et différents tests fonctionnels (2) de cartographier la surface d’interaction entre les 3 partenaires du complexes, en utilisant des antagonistes de PCPE-1 récemment développés dans l’équipe. Les résultats de ce travail permettront de mieux comprendre le fonctionnement du complexe de maturation des collagènes et, potentiellement, d’affiner des stratégies thérapeutiques visant à augmenter ou à diminuer l’activité de ce complexe protéolytique
Techniques utilisées : culture cellulaire, production et purification de protéines, mutagenèse dirigée, tests enzymatiques, techniques biophysiques (résonance plasmonique de surface, dichroïsme circulaire, fluorescence…)
Equipe d’accueil : Métalloprotéases et Remodelage Tissulaire
Sandrine Vadon-Le Goff (mail : sandrine.legoff@ibcp.fr / tél : 04-37-65-29-28)
Publications d’intérêt
- Structural basis for the acceleration of procollagen processing by procollagen C-proteinase enhancer-1. Pulido D, Sharma U, Vadon-Le Goff S, Hussain S, Cordes S, Mariano N, Bettler E, Moali C, Aghajari N, Hohenester E, Hulmes D. Structure, sous presse.
- Procollagen C-proteinase enhancer grasps the stalk of the C-propeptide trimer to boost collagen precursor maturation. Bourhis JM, Vadon-Le Goff S, Afrache H, Mariano N, Kronenberg D, Thielens N, Moali C, Hulmes DJ. Proc Natl Acad Sci U S A. 2013, 110(16):6394-9.
- BMP-1/tolloid-like proteinases synchronize matrix assembly with growth factor activation to promote morphogenesis and tissue remodeling. Vadon-Le Goff S, Hulmes DJ, Moali C. Matrix Biol. 2015;44-46:14-23.
